腦利鈉肽（BNP）

抗體參數(shù)

名稱	腦利鈉肽抗體（BNP antibody）
貨號	K136m1	R195e5
類型	單克隆抗體
反應(yīng)物種	人
應(yīng)用平臺推薦配對	化學(xué)發(fā)光、免疫層析
	R195e5（捕獲）-K136m1（檢測）
純度	Protein A/G純化，純度>95%
緩沖液	1xPBS，pH 7.4
儲存	-20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復(fù)凍融

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

化學(xué)發(fā)光平臺（ALP）

1.雅培樣本符合率

用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑，檢測55例雅培賦值樣本，樣本符合率（R²）為0.9988。

編號	樣本濃度（pg/mL）	RLU
1	＜10	8355
2	＜10	9563
3	15.3	21366
?	?	?
54	3750	5689869
55	＞4000	6971339

表1. BNP臨床對比分析數(shù)據(jù)（雅培賦值）

圖1. BNP臨床對比分析（雅培賦值）

2.最低檢測限

用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑，對零濃度稀釋液重復(fù)測定20次，計算最低檢測限。

名稱	濃度（pg/mL）	RLU平均值	線性方程
校準品S1	0	4833	y=274x+4833
校準品S2	5	6203	y=274x+4833
20次重復(fù)測定零濃度稀釋液RLU值
4766	4836	5122	4879
4933	4988	4820	4566
4803	5103	4766	4968
5108	5269	4822	4875
4998	5169	4923	4888
RLU均值		4930
SD		165.8
平均值+2SD		5262
最低檢測限（pg/mL）		1.565

表2. BNP化學(xué)發(fā)光試劑最低檢測限

3.線性

將濃度為5010pg/mL的雅培賦值高濃度樣本，用樣本稀釋液稀釋為40%、20%、10%、2%、0.2%和0.1%六個濃度。用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑對高濃度樣本及六個稀釋樣本進行檢測，計算相關(guān)性。

百分比	濃度（pg/mL）	RLU	絕對偏差	相對偏差
100%	5010	7616661	/	-0.10%
40%	2021	3045882	/	0.70%
20%	1002	1487627	/	-0.10%
10%	492.5	708500	/	-1.80%
2%	101.3	110277	/	0.80%
0.2%	10.18	12850	-0.06	/
0.1%	4.93	6114	-0.07	/
相關(guān)性：0.99999

表3. BNP化學(xué)發(fā)光試劑線性

4.重復(fù)性

利用同一批BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑對濃度為50.28pg/mL和1019pg/mL的雅培賦值樣本各重復(fù)檢測10次，其測量濃度變異系數(shù)（CV）均小于2.5%。

低值樣本
編號	RLU	濃度（pg/mL）
1	65235	51.01
2	63682	49.80
3	65222	51.00
4	64580	50.50
5	65607	51.30
6	66890	52.30
7	66338	51.87
8	62438	48.83
9	63502	49.66
10	67082	52.45
平均值	/	50.87
標準差	/	1.187
CV	2.3%

表4. BNP化學(xué)發(fā)光試劑重復(fù)性（低值）

高值樣本
編號	RLU	濃度（pg/mL）
1	1492215	1003
2	1462854	985.8
3	1507507	1015
4	1483346	999.2
5	1571733	1048
6	1572866	1048
7	1565617	1053
8	1516682	1021
9	1505978	1014
10	1482275	998.5
平均值	/	1018.55
標準差	/	23.691
CV	2.33%

表5. BNP化學(xué)發(fā)光試劑重復(fù)性（高值）

5.準確度

將濃度為1001pg/mL的雅培賦值高濃度樣本，按照1：9的體積比加入到濃度為49.23pg/mL的低濃度血清中，配制成濃度為144.41pg/mL的回收樣品，用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑進行檢測，計算回收率。

待測物	測定濃度（pg/mL）	RLU	濃度平均值（pg/mL）
高濃度樣本	1002	1487627	1004.50
	999.5	1483804
	1012	1502919
低濃度血清	50.16	64144	49.57
	49.88	63785
	48.68	62245
回收樣品	144.2	184797	140.77
	137.8	176586
	140.3	179794
回收率	95.72%

表6. BNP化學(xué)發(fā)光試劑回收率

6.熱穩(wěn)定性

將BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑組份分別放置于37℃培養(yǎng)箱和4℃冰箱中加速7天，分別測試高、低值質(zhì)控品，比較其偏差。

低值質(zhì)控品
編號	RLU		濃度（pg/mL）
編號	4℃7天	37℃7天	4℃7天	37℃7天
1	62501	60962	48.88	47.68
2	65516	62219	51.23	48.66
3	63798	60936	49.89	47.66
偏差	4.2%

表7. BNP化學(xué)發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性（低值）

高值質(zhì)控品
編號	RLU		濃度（pg/mL）
編號	4℃7天	37℃7天	4℃7天	37℃7天
1	1492215	1451232	1005	978.2
2	1502919	1436552	1012	968.6
3	1487627	1439458	1002	970.5
偏差	3.6%

表8. BNP化學(xué)發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性（高值）

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BNP臨床診斷意義

腦鈉肽（BNP）又稱B型利鈉肽，由32個氨基酸組成，是哺乳動物心肌細胞的主要利鈉肽之一。BNP的最初翻譯產(chǎn)物為前BNP原（preproBNP），含134個氨基酸；切除信號肽后形成含108個氨基酸的BNP前體（proBNP），并儲存于心肌分泌顆粒中。當心肌細胞在跨壁應(yīng)激增加時，proBNP釋放并裂解成有活性的BNP和無活性的N端腦鈉肽前體（NT-proBNP）。BNP最終與鈉肽C受體（NPR-C）結(jié)合，繼而被胞吞和溶酶體降解。

腦鈉肽（BNP）與心功能不全、心肌缺血

BNP濃度在心功能紊亂時，隨著心室壓力的增大而顯著升高；心衰患者接受治療12小時之后，BNP濃度顯著下降。因此BNP可作為心力衰竭和心肌梗死預(yù)后的一個獨立預(yù)測因子，動態(tài)監(jiān)測心衰患者的治療效果，是急診室心衰診斷的“金標準”。

BNP參考值（依據(jù)2008ESC心衰指南）：

BNP< 100pg/ml	基本排除心衰，其陰性預(yù)測準確性高達97.7%
100pg/ml< BNP< 400pg/ml	不確診
BNP >400pg/ml	心衰可能

腦鈉肽（BNP）與急性缺血損傷

心肌缺血可觸發(fā)許多內(nèi)源性細胞保護因子如BNP的釋放。在急性心肌梗死的大鼠心臟模型中，外源性給予BNP，可以以濃度依賴性的方式限制梗死面積，這是一種獨立于肽的內(nèi)分泌的細胞保護作用。BNP的這種急性保護作用機制似乎與第二信使三磷酸鳥苷轉(zhuǎn)化為環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）的增加有關(guān)，并涉及線粒體ATP敏感性鉀（K_ATP）通道的開放。許多內(nèi)源性保護介質(zhì)被認為是作用于G蛋白偶聯(lián)受體，通過線粒體K_ATP通道開放產(chǎn)生抗缺血作用的。在一些心臟疾病狀態(tài)下， G蛋白偶聯(lián)受體反應(yīng)可能下調(diào)；此時BNP采用了新的分子信號途徑，BNP/NPR-A誘導(dǎo)cGMP升高并激活cGMP依賴性蛋白激酶-I（cGK-I），通過cGMP/cGK-I途徑開放K_ATP通道。因此BNP/NPR-A信號通路可以作為一種非常有效的儲備救助途徑，保護和挽救組織。

腦鈉肽（BNP）與心肌梗死后重塑

心肌梗死后心肌BNP表達的持續(xù)升高，影響組織重塑，這個可能與BNP抑制成纖維細胞活性和心肌細胞肥大作用有關(guān)。研究表明，梗死后BNP和心鈉素（ANP）對心肌成纖維細胞有明顯作用。這兩種肽都抑制體外缺氧時心臟成纖維細胞的膠原合成，并抑制血管緊張素Ⅱ刺激時的成纖維細胞增殖。在bnp基因缺失的小鼠中發(fā)現(xiàn)了多灶性心臟纖維化。NPR-A-/-敲除小鼠也會出現(xiàn)高血壓，并伴有過度表達心肌肥大和纖維化。

綜上所述，腦鈉肽（BNP）是一種多效性肽，其對無癥狀左室功能不全、心力衰竭、急性缺血和心肌梗死等心臟疾病具有重要的臨床診斷和治療意義。

參考文獻

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