血清淀粉樣蛋白A（SAA）抗體的制備

SAA是一種急性時相蛋白，當炎癥或感染急性期在體內含量迅速升高，當感染得到控制后又會迅速恢復至正常水平，是常見的炎癥標志物。對體內SAA水平進行檢測對于細菌及病毒感染的診斷具有重要的指導意義。

SAA抗體是SAA檢測試劑盒的核心原料，目前SAA抗體的制備可以分為利用雜交瘤技術制備和利用基因工程制備兩大類，兩種生產方式在制備周期、實驗難度、抗體產量等方面有所區別，本文就SAA抗體的制備相關知識點做一個介紹。

雜交瘤技術制備SAA抗體

雜交瘤技術是目前主流的SAA抗體制備方式，利用SAA抗原蛋白免疫宿主（通常為Balb/c小鼠），對宿主進行4-5次免疫后取其脾細胞與骨髓瘤細胞融合得到雜交瘤細胞。再對雜交瘤細胞進行陽性克隆篩選及單克隆篩選得到雜交瘤細胞單克隆。得到雜交瘤單克隆細胞株后，對細胞株進行培養（可以將單克隆細胞株注入小鼠腹水進行體內培養，也可以利用培養瓶進行體外培養）即可得到鼠源SAA單克隆抗體。

對于免疫熒光、膠體金、膠乳比濁等免疫檢測平臺，僅僅有一株SAA抗體是不夠的，至少需要一對能夠同時與SAA蛋白結合的配對抗體才能夠完成對SAA蛋白的檢測。因此，需要篩選得到多株單克隆雜交瘤細胞株并制備得到多種不同的SAA單抗，利用雙抗夾心ELISA的方式進行配對抗體的篩選。

基因工程技術制備SAA抗體

利用雜交瘤技術制備SAA存在雜交瘤細胞退化及批次產量少等問題，利用基因工程技術可以很好的解決這些問題。

體外重組技術制備重組SAA抗體首先需要獲得SAA的抗體序列（通過對雜交瘤細胞進行測序即可獲得SAA抗體序列），抗體序列合成基因并將基因導入到載體之中構建表達質粒，將構建好的質粒轉入到合適的表達系統中（通常為哺乳動物細胞表達系統）進行重組表達，最后通過protein A/G純化得到重組SAA單抗。

與雜交瘤細胞相比基因序列是可以永久保存的，不用擔心因雜交瘤細胞退化而導致無法生產抗體的問題。

哺乳動物細胞表達系統

哺乳動物細胞表達系統分為瞬時轉染和穩定細胞系構建兩種制備方式。瞬時轉染能夠快速的表達得到SAA抗體，但是產量較低。穩定細胞系構建的實驗周期比瞬時轉染長，實驗難度也較大，但是利用穩定細胞系構建技術能夠實現SAA抗體的長期、穩定、大量的生產。

如果SAA抗體的需求量很大，利用瞬轉技術需要進行多個批次的制備才能夠滿足需求，此時會存在批間差的問題，但是利用穩定細胞系構建則能很好的滿足客戶的需求（可一次性生產克級至百克級SAA抗體）。

雜交瘤技術與基因工程技術對比

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